培养基+必需营养物质+适合的温度+适合的pH模拟体内环境是最常见的细胞体外培养方式，促使细胞在体外的环境中正常生长增值。

事实上细胞在体内真实的生长环境十分复杂，许多细胞在体外平面培养表面会逐步变得更加扁平，分裂异常，并丧失其分化表型。

如何规避常规2D培养带来的细胞异常风险？

2022年了，该懂点3D细胞培养了！

3D培养是什么？

3D细胞培养是一种在人工创造的环境中生物细胞可以在所有三维空间中生长的技术，使细胞能够在载体的三维立体空间结构中迁移、生长，构成三维的细胞载体复合物，3D细胞培养允许细胞在体外向各个方向生长，类似于它们在体内的生长方式。

3D培养的优势

? 在体外模拟复杂的组织结构和体内形态，接近体内正常细胞生长环境

? 展示分化等细胞活动和细胞间反应，实现真实的细胞生物学和功能

? 准确建立靶组织模型，有效预测病程和药物反应

? 使用少量细胞数，实现快速生长，兼容自动化仪器，降低成本

3D培养助手——NEST细胞小室

细胞小室在3D细胞实验中是强有力的工具，适用于共培养实验、趋化实验、细胞迁移实验、细胞侵袭以及药物转运。

细胞小室作为通透性支持物可以有效改善极性细胞的培养，允许细胞从其基底面和顶面分泌和吸收分子，从而以更为自然的方式进行代谢，大程度的模拟体内环境以培养某些特殊的细胞系。

NEST细胞小室帮助你轻松建立起“生理上的细胞-细胞与细胞-细胞外基质”相互作用，模拟天然组织的特异性！

NEST细胞小室的优势

? 全规格孔径：小至0.4μm，大到8μm，能够满足大多数较大细胞（如多数肿瘤细胞）穿膜的需求。

? 创新的边缘设计：便于轻松加样。

? PC膜：低吸附率，减少小分子蛋白和其他化合物的损失

? PET膜：透明度佳，具有更好的光学清晰度，方便观察细胞状态

? 与大部分固定与染色时用的溶剂相容

3D培养Transwell实验细胞小室使用五大问

Q：使用过程中细胞为什么不转移？

A：很可能是上室混有高浓度血清或者是小室孔径不对。

Q：细胞小室培养后的细胞染色时发现细胞分布不均一？

A：可能有以下3种原因：1. 小室是否平衡放置于孔板中2.细胞悬液加入时是否局部过多，在使用过程中细胞悬液要混匀，建议滴加3.小室是否有倾斜或晃动

Q：复孔间为何差距较大？

A：计数不准确或加入多个小室时细胞发生沉降现象，使用中每加一个小室后建议重新混匀。

Q：迁移/侵袭实验中细胞为何未能迁移至基底室？

A：可能有以下2种原因：1.选择的膜孔径偏小。在使用前需选择合适孔径的膜。2.小室下面的气泡会妨碍细胞迁移，导致局部无细胞迁移。可以先放入小室，再先加培养基，避免气泡产生。

Q：迁移/侵袭实验中，对照组和测试组之间没有差别

A：可能有以下2种原因：1.使用的膜孔径大小不合适，太大或太小都会导致细胞很容易迁过去或者很难迁移。2.小室膜的上层擦拭不充分。一些实验只需要观察基底面的细胞，但是两面的细胞会被染上色并检测到，所以要擦去上层。