1. 什么情况下需要使用不含酚红的GelNest™基质胶？
对于涉及颜色检测的实验，推荐使用不含酚红的GelNest™基质胶，如使用荧光染料对内皮细胞成管的定量；
对子宫内膜细胞培养必须使用不含酚红的GelNest™基质胶。
不含酚红的GelNest™基质胶也可以应用于一些体内应用研究。因酚红与一些非甾体雌激素结构相似，有显著的雌激素活性，在实验动物体内可能具有干扰内分泌与荷尔蒙代谢的能力。此外，酚红是一种潜在的内分泌干扰物，有可能会干扰实验动物体内激素的自然产生和代谢能力。
2. 高浓度GelNest™基质胶可以用于哪些实验？
高浓度GelNest™基质胶可用于3D细胞培养、裸鼠体内成瘤实验等体内应用研究。高浓度GelNest™基质胶的蛋白浓度高，和肿瘤细胞一起皮下注射到小鼠体内后保持其完整性并保持原位，以便进行原位分析或未来肿瘤的取样。
3. 哪些情况下应该选用薄胶法/厚胶法？3D细胞培养有哪些应用？
薄胶法主要用于细胞贴壁和增殖，如原代细胞培养仅需要一层薄薄的蛋白层辅助而非蛋白基质；
厚胶法主要用于3D细胞培养，成环试验，如大鼠主动脉组织分化为毛细管样结构，以及进行细胞侵袭实验等。
3D细胞培养实验，主要是用于研究细胞与细胞间的相互作用以及复杂结构等。
4. GelNest™基质胶可以用于诱导ES/iPS细胞分化的研究吗？
可以，实验表明GelNest™基质胶可以用于ES/iPS细胞的分化研究，建议使用干细胞专用的GelNest™基质胶。
5. 如何从GelNest™基质胶中收获细胞？
推荐使用中性蛋白酶，如分散酶来收获培养在GelNest™基质胶中的细胞。
中性蛋白酶相比胰蛋白酶、胶原蛋白酶或其它蛋白水解酶能够更温和有效地获得单细胞悬液，不会损伤细胞或分裂细胞表面蛋白。对于需要继续接种培养或生物检测的细胞，使用中性蛋白酶不会产生损伤，此外中性蛋白酶也可以用于组织的分离。
也可使用相应的细胞复苏溶液进行代谢实验和RNA回收实验，建议在4℃使用细胞复苏溶液进行非酶反应的细胞收获。
其它方法：降低温度至4-6℃使基质胶解聚，这需要一定的时间并且仅适合一部分应用；或者离心以破坏基质胶结构。
6. 使用GelNest™基质胶培养的细胞，如果需要进行切片或者免疫组织化学及免疫荧光检验，该怎样固定呢？如何避免解聚？
可以使用2-4%多聚甲醛进行固定，如2-4%多聚甲醛配制在PBS中，室温固定20分钟。某些情况下，在固定后可能出现解聚的情况，可以加入1%戊二醛(戊二醛作为固定剂，常用于电镜检测)。
如果需要进行免疫荧光检验，加入戊二醛后，会出现明显的背景荧光。为了解决这一问题，建议操作中在固定之后，使用NaBH4进行淬灭。NaBH4极易起泡，进行该步骤时，必须在水平操作台上小心操作，避免晃动，尽量减少气泡的形成。另外，也可以尝试使用较低浓度(如0.1%到0.5%)的戊二醛进行固定，浓度越低，背景荧光信号越少。
7. 提取过程会引起层粘连蛋白变性吗？
不会引起层粘连蛋白变性。
注：NEST提供的各种基质胶应用方案仅供参考，实际须根据实验目的进行条件的优化。
